石蜡切片HE染色实验步骤
1、通过梯度脱蜡过程:石蜡切片先在二甲苯I中浸泡10分钟,再到二甲苯II、III各10分钟,接着是无水乙醇I、II各5分钟,90%、80%、70%酒精各5分钟,最后50%酒精5分钟,以确保染色的准确性和清晰度。
2、he染色的基本步骤如下:石蜡切片脱蜡至水。依次将切片放入二甲苯Ⅰ10min-二甲苯Ⅱ10min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。苏木素染细胞核。
3、取组织切片:将要观察的组织切片经过脱水、清洁、包埋等处理后,放置在载玻片上。 焙烧:将载玻片放入烤箱中进行焙烧,使组织切片贴附在玻片上。 脱蜡:将载玻片放入脱蜡剂中,使组织切片中的蜡质溶解。 水洗:将载玻片放入水中洗涤,去除脱蜡剂。
4、二)HE染色石蜡切片的制作过程 步骤一:取材与固定:取动物新鲜组织块(一般厚度不超过0.5厘米)投入预先配好的固定液中(10%福尔马林,Bouin氏固定液)使组织、细胞的蛋白质变性凝固,以防止细胞死后的自溶或细菌的分解,从而保持细胞本来的形态结构。
5、固定:目的是为防止组织细胞离体后细胞发生自溶,以保持形态结构的原有状态。常用的固定剂有甲醛、乙醇。(2)包埋:目的是增强组织材料的硬度,便于切片。常用的包埋剂有石蜡、树脂等。(3)切片:需专用切片机切片,厚度通常在5~8pμm,并将切片裱贴在玻璃载片上。
6、he染色的具体步骤如下:样品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。染核:苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤。分色:镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。染胞质:浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。吹干或自然晾干细胞爬片后,中性树胶封片。
石蜡切片的制作有哪些注意事项
切片机应放置平稳,切片刀ayx爱游戏、蜡块应安装牢固,否则因震动而出现切片褶皱或厚薄不均。切片时要及时清洁刀口、除去蜡屑,否则易引起切片破碎。切片刀与蜡块切面的倾斜角以5°-10°为宜,过大则切片上卷,不易连接成蜡带;过小则切片皱起。
以下是注意事项: 固定时间:固定的时间一般在1-2小时左右,不宜过长。固定时间过长会导致组织硬化,影响后续的制片过程。 固定剂的浓度和pH值:应根据组织类型和固定剂的种类选择合适的浓度和pH值。一般来说,甲醛的浓度在1-4%之间,pH值在2-4之间。 取材:固定后的组织应立即取材。
刮净组织包埋盒周边的余蜡,以防切片过程中样品松动影响切片质量。切片前,把切片机上相关锁杆或螺旋拧紧,否则可能出现跳片、切片厚薄不均现象。先粗修,修片厚度大约设置在15-30微米,质地较硬的组织或较小的组织应再薄一些。粗修至组织全暴露后再细修。
夏季宜采用熔点较高的石蜡(56,58℃),冬季宜选用熔点较低的石蜡(52,54℃ayx爱游戏)。切片 传统的切片方法是将包埋好的蜡块用刀片修成规整的梯形,粘于小木块上,上机切片。新型的切片方法是将包埋框(见下图)代替木块的支撑作用,上机切片。
在一般光镜下不易清楚区别出;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡,而能清晰辨认其形态结构。
\x0d\x0a\x0d\x0a脱水时应注意:(1)在高浓度或无水乙醇中,每级停留的时间不宜太长,否则可使组织收缩变脆,影响切片;(2)如需过夜,应停留在70%乙醇中,也可长期保存,可防止因时间倒不开而影响后续步骤。
石蜡切片制作
1、切片制作将预冷的蜡块固定在石蜡切片机上,使蜡块的切面与刀口成平行方向,刀的倾斜度通常15℃,转动轮转推进器,调节切片厚度为4μm,切成厚度均匀的切片。左手持毛笔,右手旋动切片机转把,切片带出来之后,用毛笔轻轻托起,再用镊子轻镊蜡片,以正面放入展片箱中,其水温45℃左右。
2、二甲苯的作用:由于二甲苯能溶解石蜡,故石蜡切片在HE染色前必须先经过二甲苯处理,以脱去组织中的石蜡使染料与组织中各种成分结合。染色后二甲苯起透明切片的作用。(2)酒精的作用:因为酒精既可溶解于二甲苯又溶解于水,组织脱蜡后经由高到低的梯度浓度酒精处理后可进行水洗并与水溶性的染色剂结合。
3、石蜡切片是一种以石蜡为材料制作极薄切片的技术,其切片厚度可达2微米甚至1微米,这是冰冻切片和火棉胶切片难以实现的。石蜡切片的优势还在于其批量制作和连续切片的能力,包埋在石蜡中的组织块可长期保存。因此,石蜡切片在切片制作中广泛应用。在切片前,需要做好一系列准备工作。
4、【答案】:主要过程包括 (1)固定:目的是为防止组织细胞离体后细胞发生自溶,以保持形态结构的原有状态。常用的固定剂有甲醛、乙醇。(2)包埋:目的是增强组织材料的硬度ayx爱游戏,便于切片。常用的包埋剂有石蜡、树脂等。(3)切片:需专用切片机切片,厚度通常在5~8pμm,并将切片裱贴在玻璃载片上。
切机平切和侧面切有什么不同
刀口位置不同。切机平切和侧面切最大的不同便是刀口位置不同,平切是沿着横切面的弦进行切割,而侧面切是沿着侧面的弦进行切割。切片机,制作供显微镜观察用的切片的装置。
没有利弊之分,圆切刀的纵向分切的,平切刀是横向分切的。
滚刀切也平刀切最大的区别是:切的速度与切出来的精确度!一般切A4纸的都是用滚刀切的,平刀切不仅在纸的毛边上有问题,而且在精确度上也没有滚刀切好。滚刀:两把刀,一把是底下的固定刀。一把是滚筒上面的刀(那把刀是旋转的)。平刀:就像我们平常切豆腐一样。也是两把,上下刀。
主要是所用的刀不同。他们各有优缺点,圆刀模切机速度快,效率高,节约人工,从事复杂工艺可自动排废;产量大,就拿我们用的飞新达的圆刀机来说,最高速度可达64m/h;占地面积小,节约空间。
最后,挤压分切,一个略显低调但潜力无限的选择。/在国内可能并不常见,但它的同步切割技术和包角设计,使它能够应对多种材料,从薄膜到纸张,甚至无纺布,这无疑是分切方式的创新突破,预示着分切机技术的未来发展。分切,这项看似微小的操作,实则关乎产品质量的稳定。
面包切片机要如何清洗
1、面包切片机的清洗主要是前托盘和刀片以及机身。这几个地方我们可以选择干净的抹布,蘸一些洗洁精水擦洗就可以了。如果很脏的话,也可以使用小苏打水清洗,清洗的时候一定要注意切掉电源,还有刀片的部分,避免划手。
2、在清洁时,将烤面包机的烤架拆卸下来,并使用温和的清洁剂和海绵擦拭干净。记住,保持烤面包机的清洁和安全是一个良好的使用习惯。
3、清洗面包机的面包桶,直至干净清洁,将面包桶从面包机中取出,倒入水、牛奶或鸡蛋等液体,准备和面。可根据自己口味选择,在面包桶的一角加入盐,如果喜欢甜味,就可在面包桶的另一角多加糖。加入作料后,将面粉倒入其中,并且使面粉把水面覆盖住。
4、要想切好面包片可以参考以下方法:把面包放在干净的砧板上 刀在火上稍微烧一下烧热就好了,不要把刀烧成黑色 趁着刀的温度开始切面包,因为冷面包遇到热刀的时候,与刀接触的地方会迅速软化,便不至于掉渣了,面包片看起来平滑整齐。
5、将烤面包机放在平坦,干净,固定的表面上。2,打开电源,按“开关”功能按钮,将“面包色控制器”放入“3-4”档,烘烤约120S后即可食用。3,选择烘烤程度后,将面包放入槽口,然后按“开关”功能按钮将面包切成任何槽口。4,达到选定的烘焙水平后,面包将自动弹出。